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熒光原位雜交-原位雜交-武漢貝科新肽公司

武漢貝科新肽科技有限公司

主營產品：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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菌落的裂解及DNA結合于纖維素濾膜

（1）在一張保鮮膜上制作一個裝有0.5mol/L NaOH的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，將濾膜放到小洼上，展平保鮮膜，使濾膜均勻濕潤，讓濾膜留于原處2-3分鐘。

（2）用干紙巾從濾膜的下方吸干濾膜，用一張新的保鮮膜和新配制的0.5mol/L NaOH重復步驟（1）。

（3）吸干濾膜，將濾膜轉移到新的帶有1mol/L Tris·Cl(pH7.4）的保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜，再重復一次該步驟。

（4）吸干濾膜，把它轉移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4）的保鮮膜小洼上5分鐘后吸干濾膜，轉移到一張干的濾紙上，置于室溫20-30分鐘，使濾膜干燥。

（5）將濾膜夾在兩張干的濾紙之間，在真空烤箱中于80℃干烤2小時，固定DNA。

（6）將固定在膜上的DNA與32 P標記的RNA進行雜交。

原位雜交（In Situ Hybridization）是指將特定標記的已知核酸序列為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交，從而對特定核酸序列進行定量定位的過程。這個技術可以用于研究細胞或組織中特定基因或DNA序列的表達和定位，從而幫助研究者深入理解和探究生物學過程。原位雜交有幾種不同的類型，包括熒光原位雜交和其他用于基因表達分析的方法。